鎳Ni柱是大家在蛋白純化中，應用較多的一種純化柱料，屬于固定化金屬離子親和色譜中的一種，1975年由Porath等發明，其間不斷完善發展至今。
原理(li)：過(guo)渡(du)金屬通過(guo)與(yu)電(dian)子(zi)(zi)供體配基(ji)(ji)上，能與(yu)金屬離子(zi)(zi)相互作用的羧基(ji)(ji)或氨基(ji)(ji)的電(dian)負(fu)性元(yuan)素（O，N），形成較穩定的金屬螯合物。
在IMAC中(zhong)，一個Ni2+有六(liu)個配位位點(dian)，被含有3，4或(huo)5個電子供體(ti)基團（配位位點(dian)）的螯合(he)物固定在吸附劑上，而剩下未被占據的位點(dian)暴露(lu)于溶液中(zhong)，能與組氨酸(suan)，半胱氨酸(suan)，和色氨酸(suan)的側鏈或(huo)組氨酸(suan)標簽的蛋(dan)白特異性(xing)結合(he)。
鎳Ni柱的(de)使(shi)用與保(bao)養(yang)
鎳(nie)Ni柱的洗(xi)脫通常(chang)采用(yong)競爭洗(xi)脫，先用(yong)低濃度(du)的咪唑將(jiang)雜蛋白和結合不牢的蛋白洗(xi)去，再用(yong)合適的濃度(du)將(jiang)目(mu)的蛋白洗(xi)脫。洗(xi)脫的先后順序與蛋白的結合能(neng)力相關。
1、對(dui)于一般的預裝柱，上(shang)樣(yang)前，樣(yang)品(pin)需要(yao)使(shi)用0.22μm/0.45μm濾(lv)膜進行過(guo)濾(lv)或者離心處(chu)理，以避免樣(yang)品(pin)中有細(xi)胞碎片等固體物質(zhi)，堵塞柱子。
2、如果(guo)細胞裂解(jie)后非常粘稠，需考慮是否(fou)因為DNA、RNA這類核酸物質(zhi)過多(duo)，需要加入(ru)核酸酶去除，以降(jiang)低樣(yang)品粘稠度，提高上樣(yang)速度及(ji)洗脫效(xiao)果(guo)。
3、柱(zhu)子(zi)使用過程中，不(bu)能(neng)超(chao)過填料的壓(ya)力，以(yi)免(mian)填料被壓(ya)塌。
4、每次(ci)使用(yong)后，可使用(yong)5-10倍柱體(ti)積(ji)的純水或(huo)者結(jie)合緩沖溶液對(dui)柱子進行清洗。（如(ru)果出(chu)現載量(liang)嚴重下降或(huo)者壓力增加，需考慮徹底清洗）
