在生物制藥領域，層析純化是關鍵步驟，親和層析介質循環使用次數直接影響分離提純效果。根據不同產品特性和物料性質，介質壽命均不相同。
本(ben)文以(yi)金(jin)屬(shu)螯合(he)(he)(he)鎳(nie)親(qin)和(he)(he)(he)介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)為例，通過(guo)金(jin)屬(shu)螯合(he)(he)(he)親(qin)和(he)(he)(he)介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)的原理與(yu)使用(yong)方式，來(lai)檢測(ce)介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)壽命(ming)。金(jin)屬(shu)螯合(he)(he)(he)親(qin)和(he)(he)(he)介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)捕獲蛋白質(zhi)(zhi)表(biao)面的氨(an)基酸(suan)，分離(li)出對金(jin)屬(shu)離(li)子有(you)吸附(fu)作(zuo)用(yong)的多肽(tai)、蛋白和(he)(he)(he)核(he)苷酸(suan)。針對其純化原理，研究介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)壽命(ming)驗證方法與(yu)清洗檢測(ce)，為研究不(bu)同用(yong)途的層析介(jie)(jie)(jie)質(zhi)(zhi)壽命(ming)提供思(si)路與(yu)數(shu)據支(zhi)持。
介質壽(shou)命(ming)驗(yan)證是藥品研發，尤其是生物制品的(de)重(zhong)點關注內容。企業在做介質壽(shou)命(ming)驗(yan)證時，建(jian)議采用(yong)等比例縮小純(chun)化規模，確(que)(que)定每步純(chun)化所用(yong)介質的(de)使用(yong)次數，確(que)(que)保(bao)親(qin)和層析介質壽(shou)命(ming)在使用(yong)期限內使用(yong)，介質符合(he)(he)生產需求，防止交叉污染(ran)，保(bao)障產品的(de)質量合(he)(he)格。
親(qin)和(he)(he)層(ceng)析介(jie)(jie)質(zhi)在每次使用(yong)(yong)時，未被洗(xi)脫和(he)(he)流(liu)穿的(de)(de)物質(zhi)或雜質(zhi)會吸附在填料(liao)上，需要采用(yong)(yong)特定的(de)(de)清(qing)洗(xi)和(he)(he)再(zai)生程序對層(ceng)析介(jie)(jie)質(zhi)進行清(qing)洗(xi)、再(zai)生、保(bao)存(cun)，以恢(hui)復介(jie)(jie)質(zhi)開始的(de)(de)狀態。長期(qi)使用(yong)(yong)的(de)(de)介(jie)(jie)質(zhi)，會逐漸失(shi)去效力，如清(qing)洗(xi)后(hou)污染物殘留量、介(jie)(jie)質(zhi)使用(yong)(yong)參數變(bian)化、產品(pin)重要指標（純度）和(he)(he)收率均(jun)不在控制范圍之內，則說(shuo)明介(jie)(jie)質(zhi)的(de)(de)壽命已到期(qi)。
親和層析是(shi)一種吸附層析，抗(kang)原（或抗(kang)體(ti)）和相(xiang)應的(de)(de)抗(kang)體(ti)（或抗(kang)原）發生特異性結(jie)合(he)，而這種結(jie)合(he)在一定(ding)的(de)(de)條件(jian)下(xia)又是(shi)可逆的(de)(de)。所以將(jiang)抗(kang)原（或抗(kang)體(ti)）固(gu)相(xiang)化后，就可以使存在液相(xiang)中的(de)(de)相(xiang)應抗(kang)體(ti)（或抗(kang)原）選擇性地結(jie)合(he)在固(gu)相(xiang)載體(ti)上，借以與液相(xiang)中的(de)(de)其他蛋白質(zhi)分(fen)開(kai)，達到分(fen)離提純的(de)(de)目的(de)(de)。
與產品實際生產的SOP作對比，如(ru)不在SOP控制范圍內，則說明介質應該更(geng)換(huan)(huan)了，只(zhi)有對親和層(ceng)析介質進行及(ji)時(shi)更(geng)換(huan)(huan)，才能確保(bao)生物制品質量。
本次(ci)研究結果顯示(shi)，TOC檢(jian)(jian)(jian)測值(zhi)范(fan)圍(wei)在(zai)22.700～262.000ppb之間，RSD為(wei)(wei)77.027%；pH檢(jian)(jian)(jian)測值(zhi)范(fan)圍(wei)在(zai)5.400～6.900之間，RSD為(wei)(wei)7.103%；內毒素檢(jian)(jian)(jian)測值(zhi)范(fan)圍(wei)在(zai)0.600～1.100EU/mL之間，RSD為(wei)(wei)9.443%；蛋(dan)白未檢(jian)(jian)(jian)出，電導均(jun)＜0.25μs/cm；TOC洗(xi)(xi)脫(tuo)峰(feng)圖波動明顯，pH洗(xi)(xi)脫(tuo)峰(feng)圖稍有波動，但都電導洗(xi)(xi)脫(tuo)峰(feng)圖相對平穩。
結果表(biao)明，雖然(ran)TOC和pH峰圖存在(zai)一定(ding)波動(dong)，但(dan)其檢測值均(jun)處于(yu)正常(chang)標(biao)準(zhun)范圍內，另外內毒素作為(wei)輔助參考指(zhi)標(biao)，zui高(gao)值達到(dao)1.100EU/mL，已超(chao)出(chu)標(biao)準(zhun)范圍，但(dan)檢測難免存在(zai)誤(wu)差，經計算內毒素平均(jun)值僅為(wei)0.967EU/mL，符合標(biao)準(zhun)范圍。
